Лекция: Работа 1. Определение интенсивности дыхания прорастающих семян
ХОД РАБОТЫ
В данном случае интенсивность дыхания определяют по количеству СО2, выделенного 100 г сырой навески растительного материала за 1 час. Берут стеклянную банку на 300 мл, закрытую корковой пробкой, с крючком внутри для подвешивания марлевого мешочка с прорастающими семенами. Наливают из герметично закрытого сосуда 25 мл раствора барита — Ва(ОН)2 в концентрации 7 граммов чистого гидрата окиси на 1 л дистиллированной воды, предварительно несколько суток настоянного. В мешочек из марли отвешивают 10 г проросших семян или зеленых органов растений и закрепляют на крючке над раствором барита.
После этого оставляют баночку при комнатной температуре на 20-30 минут. В течение этого времени надо осторожно взбалтывать барит, не обжигая семена, для разрушения образующейся при этом пленки ВаСО3, препятствующей полноте поглощения СО2. По окончании опыта быстро вынимают мешочек с семенами и титруют этот раствор щавелевой кислотой в присутствии 2х-3х капель фенолфталеина до появления исчезающего слаборозового окрашивания (титр Н2С2О4 — 2,8636 г на 1 л дистиллята. 1 мл этого раствора, пошедшего на титрование, как раз соответствует 1 мг СО2).
Для определения интенсивности дыхания при других условиях параллельно ставят баночки в сосуды с термостатированной водой (Т=+30°С и +4°С — вода со льдом). Одновременно закладывают контрольный опыт с баритом, но без семян. Если анализируются объекты, содержащие хлорофилл, то их на все время опыта помещают в темноту, для исключения фотосинтеза.
Результаты опыта занести в таблицу:
| Объект | Варианты опыта | Навеска | Прилито Ва(ОН)2 | Количество Н2С2О4 при титровании | Разность при титровании контроля и опыта, мг СО2 | Интенсивность дыхания, мг СО2 на 100 г сырого веса в час |
Разность количества мл щавелевой кислоты, пошедшей на титрование контрольной и опытной колб, дает величину СО2 в мг, которую выражают на 100 г навески в час.
Вычисления ведут по формуле:
где А — количество мл кислоты в контрольном опыте;
В — количество мл Н2С2О4, пошедшей на титрование в опытной банке;
Д — взятая навеска.
Зарисовать установку. Сделать вывод, сопоставив интенсивность дыхания различных объектов в различных условиях.
МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ
1) баночки на 300 мл; 2) раствор Ва(ОН)2; 3) щавелевая кислота; 4) фенолфталеин; 5) бюретки для титрования; 6) герметичная установка для барита; 7) проросшие семена или зеленые части растений; 8) весы.