Лекция: Отделение и очистка продуктов.

Выделение целевого продукта из культуральной жидкости или по­лучаемого в результате процессов дезинтеграции гомогената разрушен­ных клеток осуществляется путем осаждения, экстракции или различных методов адсорбции.

Осаждениерастворенных веществ осуществляется физическими (на­гревание, разведение или концентрирование, охлаждение раствора) или химическими воздействиями, переводящими растворенное вещество в малорастворимое состояние.

Экстракция подразделяется на твердо-жидкофазную (при которой продукт из твердой фазы переходит в жидкую) и жидко-жидкофазную (когда обеспечивается перевод продукта из одной жидкой фазы в дру­гую, также жидкую фазу).

Твердо-жидкофазная экстракция сводится порой к простой обработ­ке твердого образца водой или органическим растворителем с целью из­влечения из него растворимых соединений. Достаточно широко приме­няются различные органические растворители, в частности экстрагиро­вание ацетоном, который эффективно переводит в раствор ряд липидных и белковых компонентов клеток.

При жидко-жидкофазной экстракции используются различные орга­нические растворители — алкилфенолы, эфиры, галогениды, гексан, хло­роформ и др. Почти полностью избежать инактивации позволяют методы экстра­гирования на холоде, т. е. путем использовании методов криоэкстракции. При этом уравниваются различия между твердым субстратом и культу­ральной жидкостью, поскольку и то и другое находится в замороженном состоянии (в одной фазе). Криоэкстракция проводится с применением растворителей, температура кипения которых низка и при обычной ком­натной температуре находится в газообразном состоянии.

Адсорбцияявляется достаточно распространенным методом отделе­ния продукта и рассматривается в качестве частного случая экстракции, при котором экстрагирующим агентом служит твердое тело. Механизм ее сводится к связыванию выделяемого из жидкой или газообразной фа­зы вещества поверхностью твердого тела. Традиционными адсорбентами являются древесный уголь, пористые глины и т. п.

Более современные методы разделения веществ включают хроматографию, электрофорез, электрофокусировку, которые ос­нованы на принципах экстракции и адсорбции.