Лекция: Общие понятия и принципы

Теория хроматографии далее будет рассматриваться на базе ВЭЖХ, однако все принципы полностью применимы и для других разновидностей хроматографических методов. Введем некоторые термины.

Сорбент — твердое вещество которое либо само проявляет связывающие свойства, либо удерживает на себе жидкость в варианте жидко-жидкостной хроматографии.

Элюент – жидкость или флюид используемые в качестве подвижной фазы.

Элюат — поток подвижной фазы выходящий из колонки, содержащий компоненты разделяемой смеси.

Хроматограмма — кривая, описывающая зависимость концентрации анализируемых веществ в элюате от времени.

Базовая (нулевая) линия — участок хроматограммы, соответствующий нулевому отклику детектора (нулевой концентрации) анализируемого компонента (компонентов).

Хроматографический пик — участок хроматограммы, соответствующий выходу анализируемого вещества из колонки.

В системе, содержащей элюент и сорбент разделяемое вещество может находится в трех состояниях.

I. Вещество обладает высоким сродством к сорбенту (НФ). В результате все молекулы связаны с сорбентом и вещество имеет нулевую скорость перемещения.

II. Вещество обладает высоким сродством к НФ. В результате все молекулы находятся в элюенте и вещество имеет скорость равную скорости подвижной фазы.

III. Молекула вещества, которое имеет сродство с сорбентом слегка ниже, чем сродство элюента с сорбентом (например в адсорбционной хроматографии) часть времени будет связана и неподвижна. В результате средняя скорость движения вещества будет находится в диапазоне от нуля до скорости движения элюента, в зависимости от силы связывания.

В результате, загрузив на колонку смесь веществ, подавая на нее элюент и отслеживая концентрацию веществ на выходе с помощью детектора мы можем получить хроматограмму.

Хроматографические пики в идеале представляют собой кривые нормального распределения (Гауссовы кривые), что связано со статистическими закономерностями размывания пробы в процессе хроматографии.