Реферат: Гидролиз казеина и определение в гидролизате фосфорной кислоты

При нагревании фосфопротеидов в щелочных растворах связь между белком и фосфатом разрывается, освобождая неорганическую фосфорную кислоту, которую можно обнаружить специфической реакцией с молибденовым реактивом.

Ход работы

В большую широкую пробирку (15х1,5 см) помещают 100 мг порошка казеина и заливают 3 мл 10% раствора NаОН или КОН, кипятят 10-15 минут (с момента закипания) на асбестовой сетке с обратным холодильником, затем охлаждают пробирку и проводят реакцию на продукты гидролиза.

Обнаружение белка. Белок выявляют биуретовой реакцией. В пробирку к 3 каплям гидролизата добавляют несколько капель 10% раствора едкого натра и 1 каплю 1% раствора сернокислой меди. Появляется розовато-фиолетовое окрашивание.

Обнаружение фосфата. Оставшийся гидролизат подкисляют несколькими каплями 10% раствора азотной кислоты до слабокислой реакции (по лакмусу). При этом выпадает осадок высокомолекулярных продуктов неполного гидролиза белка (альбумозы и пептоны). После отстаивания жидкость фильтруют и с фильтратом осуществляют молибденовую пробу на фосфорную кислоту.

К 5 каплям фильтрата приливают 20 капель молибденового реактива и кипятят несколько минут. Жидкость окрашивается в желтый цвет; при охлаждении ее выпадает желтый осадок фосфорно-молибденовокислого аммония, указывающий на присутствие фосфата в гидролизате.

Результаты работы заносят в таблицу 8:

Результаты опыта Таблица 8.

6.1. Что такое фосфопротеиды? Как связаны между собой белок и простетическая группа в фосфопротеидах?

6.2. Какие соединения относятся к фосфопротеидам?

6.3. Какова биологическая роль фосфопротеидов?

6.4. К какому классу сложных белков относится казеиноген молока?

6.5. Какие продукты образуются при щелочном гидролизе казеина? Как их можно обнаружить?