Лекция: Методы разрушения клеток.

Разрушение клеток проводится физическими, химическими и фер­ментативными методами. Наибольшее промышленное значение имеют физические способы дезинтеграции: 1) ультразвуком; 2) лопаточными или вибрационными дезинтеграторами — метод, обычно используемый в пилотных и промышленных установках; 3) встряхиванием со стеклян­ными бусами; 4) продавливанием через узкие отверстия под высоким давлением; 5) раздавливанием замороженной массы; 6) растиранием в специальных ступках; 7) с помощью осмотического шока; 8) многократ­ным замораживанием и оттаиванием; 9) сжатием клеточной взвеси с по­следующим резким снижением давления (декомпрессией).

Физические способы дезинтеграции отличаются большей экономич­ностью в сравнении с другими методами, однако они характеризуются отсутствием выраженной специфичности, вследствие чего обработка может отрицательно влиять на качество получаемого целевого продукта.

Мягкое и избирательное разрушение клеточной стенки обеспечива­ется применением химических и ферментативных методов. Так, бактери­альные клетки разрушаются лизоцимом в присутствии ЭДТА (этилен-диаминтетрауксусной кислоты), а клеточные стенки дрожжей зимолиазой улитки или ферментами грибного либо актиномицетного происхож­дения. Клеточные стенки микроорганизмов могут быть разрушены путем обработки толуолом или бутанолом. Элективный лизис клеток вызыва­ется воздействием ряда антибиотиков: полимиксин, новобиоцин, нистатин и др.

После дезинтеграции клеток необходимо избавляться от их «облом­ков», для чего используют те же методы, что и при сепарации, т.е. цен­трифугирование или фильтрацию.