Лекция: Обнаружение хинина

Предварительная проба на наличие хинина в моче. В делительную воронку вносят 2 мл мочи, которую подщелачивают раствором аммиака, а затем прибавляют 4 мл хлороформа и взбалтывают в течение 5 минут. От водной фазы отделяют слой органического растворителя, который взбалтывают с 3 мл 10% раствора серной кислоты. Синяя флуоресценция водной фазы указывает на наличие хинина в моче. Флуоресценция становится более выраженной, если кислую водную вытяжку облучить УФ-светом.

Реакция с реактивами группового осаждения алкалоидов. Хинин образует осадки с реактивами Бушарда, Драгендорфа, Майера, Зонненшейна и другими реактивами группового осаждения алкалоидов.

Проба на появление флуоресценции. Растворы хинина, подкисленные серной кислотой, имеют голубую флуоресценцию. При наличии ионов хлора и некоторых других ионов в растворах, флуоресценция хинина ослабляется.

Флуоресценция хинина как двухосновного основания зависит от рН среды. В кислой среде хинин имеет голубую флуоресценцию. В щелочной среде (рН=9) хинин имеет фиолетовую флуоресценцию. Продукты окисления хинина имеют желто-зеленую флуоресценцию.

Выполнение реакции. Часть исследуемого хлороформного раствора помещают в пробирку, хлороформ испаряют при нагревании на теплой водяной бане (40-55°С). К сухому остатку прибавляют 1 мл дистиллированной воды и 1 мл разбавленной серной кислоты. При нагревании хинина появляется голубая флуоресценция (особенно хорошо наблюдается в УФ-свете).

Реакция образования таллейохина. При прибавлении к раствору хинина бромной воды, а затем аммиака, образуется зеленого цвета таллейохин, который экстрагируется хлороформом.

Исследуемый остаток, после выпаривания хлороформа, обрабатывают 1 мл дистилированной воды, 2-3 каплями насыщенной бромной воды, затем 2-3 каплями 25% раствора гидроксида аммония. При наличии хинина появляется зеленое окрашивание.

При подкислении окрашивание раствора меняется, становясь сначала синим (нейтральная реакция), а затем фиолетовым и красным (кислая реакция). При взбалтывании жидкости, имеющей зеленую окраску с хлороформом последний, приобретает зеленую окраску. На воспроизводимость этой реакции влияет концентрация исследуемого вешества, обьемы прибавляемых реактивов и т.д. Этой реакции мешают соеди­нения, способные окисляться, образуя окрашенные продукты такие, как амидопирин, антипирин, кофеин и другие.

Эритрохинная реакция. Несколько капель исследуемого раствора выпаривают досуха, прибавляют 1 мл воды, слабо подкисленной серной или уксусной кислотой, каплю бромной воды и каплю 10 % раство­ре гексацианоферрата (Ш) калия. Полученную жидкость хорошо взбалтывают, затем по каплям прибавляют аммиак до щелочной реакции. При наличии хинина в исследуемом растворе появляется розовая или красно-фиолетовая окраска, которая при взбалтывании с хлороформом переходит в хлороформный слой.

Обнаружение хинина методом хроматографии. Для обнаружения хинина применяют метод хроматографии в тонком слое силикагеля. Система растворителей:эфир –ацетон- 25 % раствор аммиака в соотношении 40:20:2. Проявляющий раствор: реактив Драгендорфа. мо­дифицированный по Мунье. Зона проявления хинина окрашивается в розовато-бурый цвет, со значением Rf = 0,39±0,01.

Обнаружение хинина по УФ и ИК – спектрам. Основание хинина в этиловом спирте имеет максимумы поглощения при 236, 278 и 332 нм, а хинин в 0,1 н. растворе серной кислоты имеет максимумы поглоще­ния при 250, 316 и 346 нм. В ИК-области спектра основание хинина (диск с бромидом калия) имеет основные пики при 1235, 1510, 1030 и 1619 см-1.